无锡城内，月黑风高。游击队员林筱洁和未婚夫阿天护送两箱刚刚从日本鬼子手中夺得的潘尼西林返回组织。不料，途中遇到伪军刘二，一场激战过，阿天为保护筱洁而被捕，两箱潘尼西林也重回伪军手中。
不久之后，林筱洁以学生身份重回无锡，并与姐夫、地下游击队员慕容轩接上了头。但她并不知道自己的孪生姐姐林筱婷，此时已经打入了日军特高科内部，成为课长高家驹的一名得力参谋，而筱婷的任务就是找到那两箱潘尼西林。
但是，此时日军已经察觉到了游击队的动向，两箱潘尼西林始终毫无线索，令筱婷和筱洁万分焦虑。特别是由于筱洁在一时冲动下，刺杀了抓捕阿天的汉奸刘二，使得特高科课长高家驹加紧了对地下游击队员的搜捕。很快，他就找到了线索，一名外号小关东的大学生。
这个时候，林筱洁经过观察发现日军一处兵营布局缜密，根据推断，游击队认定两箱潘尼西林很可能就在其中。于是，一场精心策划的“夺药”计划开始了。经过一系列巧妙的布局，地下游击队员顺利地潜入日军兵营。但当进入库房时却发现，兵营里面根本没有潘尼西林，而是堆满了火药。在千钧一发之际，慕容轩引燃了炸药的导火索。
日军火药库被炸，引起了日军无锡战区最高长官渡边大佐的愤怒，于是，他对高家驹施压，命令其在最短的时间内抓获地下游击队员，并格杀勿论。高家驹受到渡边的催促，心升一计。于是，阿天等一批游击队员处决。林筱雅心知阿天就是妹妹的未婚夫，但在危急时刻，筱雅只好眼睁睁地看着阿天牺牲。但是，另一名游击队员却死里逃生，他叫小郑，其实是高家驹派进地下游击队内部的一名特务汉奸。
但是，此时此刻，游击队员们并没有发现，在几条情报内线的确认下，小郑在已经叛变的小关东的帮助下，很快加入到游击队中。通过小郑的话语，林筱洁意外得知姐姐筱雅竟然已经成了日军特高科的课长，而且未婚夫阿天也已经牺牲了。这一切的打击，令林筱洁痛不欲生。
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Mtime时光网网友评价：我一直认为所谓的影片是绘声绘色的书 比小说更高 基于虚拟与幻想 回头一想却都是现实的虚幻影子
丢豆网网友评论：内详导演的作品，有欢笑、有泪水、有喜悦、有悲伤...，虚拟世界中的感情是多彩的，并不同于我们现实中不爽就一直玩的感觉，虚拟感情的交错，当看完之后会觉得更加舒畅。
豆瓣电影网友：《盘尼西林1944》不同于其他作品，没有紧迫感、虚浮的情节及杂乱的画面，却在不断教导我们，不像老师家长苦口婆心语重心长的教诲(为遵重在这里我省略掉啰嗦这词)。我们看电影电视剧亦或综艺动漫逗号，往往是融入进去，在不知不觉中去了解这些似乎不容易被我们所发现、所理解的道理。再说近一点，看视频时设身处地会发现这是现实中更近教导的教导！
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